جين مقاومة الكاربابينيم (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
اسم المنتج
مجموعة الكشف عن جين مقاومة الكاربابينيم HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (تفاعل البوليميراز المتسلسل الفلوري)
علم الأوبئة
مضادات كاربابينيم الحيوية هي مضادات حيوية غير نمطية من فئة بيتا لاكتام، تتميز بأوسع طيف مضاد للبكتيريا وأقوى فعالية مضادة للبكتيريا. بفضل ثباتها تجاه بيتا لاكتاماز وانخفاض سميتها، أصبحت من أهم الأدوية المضادة للبكتيريا لعلاج الالتهابات البكتيرية الشديدة. تتميز الكاربابينيمات بثباتها العالي تجاه بيتا لاكتامازات واسعة الطيف بوساطة البلازميد (ESBLs)، والكروموسومات، والسيفالوسبورينازات بوساطة البلازميد (إنزيمات AmpC).
قناة
| مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل 1 | مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل 2 | |
| عائلة | عفريت | همة |
| فيك/هيكس | الرقابة الداخلية | الرقابة الداخلية |
| سي واي 5 | إن دي إم | شركة البترول الكويتية |
| روكس | أوكسا48
| أوكسا23 |
المعايير الفنية
| تخزين | ≤-18 درجة مئوية |
| مدة الصلاحية | 12 شهرًا |
| نوع العينة | البلغم، المستعمرات النقية، مسحة المستقيم |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5.0% |
| لود | 103وحدة تشكيل مستعمرة/مل |
| الخصوصية | أ) تكتشف المجموعة المراجع السلبية الموحدة للشركة، وتتوافق النتائج مع متطلبات المراجع المقابلة. ب) تظهر نتائج اختبار التفاعل المتبادل أن هذه المجموعة ليس لها تفاعل متبادل مع مسببات الأمراض التنفسية الأخرى، مثل الكلبسيلة الرئوية، والأسينيتوباكتر باوماني، والزائفة الزنجارية، والعقدية الرئوية، والنيسرية السحائية، والمكورات العنقودية الذهبية، والكلبسيلة أوكسيتوكا، والمستدمية النزلية، والأسينيتوباكتر جوني، والأسينيتوباكتر هيموليتيكوس، والفيلقية الرئوية، والإشريكية القولونية، والزائفة المفلورة، والمبيضة البيضاء، والكلاميديا الرئوية، والفيروس الغدي التنفسي، والمكورات المعوية، أو العينات التي تحتوي على جينات مقاومة للأدوية الأخرى مثل CTX وmecA وSME وSHV وTEM وما إلى ذلك. ج) مضادات التداخل: تم اختيار الميوسين، المينوسيكلين، الجنتاميسين، الكليندامايسين، الإيميبينيم، السيفوبيرازون، الميروبينيم، هيدروكلوريد السيبروفلوكساسين، الليفوفلوكساسين، حمض الكلافولانيك، الروكسيثروميسين لاختبار التداخل، وأظهرت النتائج أن المواد المتداخلة المذكورة أعلاه ليس لها رد فعل تداخلي للكشف عن جينات مقاومة الكاربابينيم KPC، NDM، OXA48، OXA23، VIM، وIMP. |
| الأدوات المعمول بها | أنظمة تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي Applied Biosystems 7500 أنظمة QuantStudio®5 لتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي أنظمة تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي SLAN-96P (شركة هونغشي للتكنولوجيا الطبية المحدودة) نظام LightCycler®480 PCR في الوقت الفعلي نظام الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي LineGene 9600 Plus (FQD-96A،هانغتشو(تكنولوجيا حيوية) جهاز MA-6000 للدورة الحرارية الكمية في الوقت الفعلي (شركة سوتشو مولاري المحدودة) نظام BioRad CFX96 لتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي نظام BioRad CFX Opus 96 لتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي |
سير العمل
الخيار 1.
كاشف الاستخلاص الموصى به: مجموعة اختبار الحمض النووي/الحمض النووي الريبوزي العام (HWTS-301)9-50، HWTS-3019-32، HWTS-3019-48، HWTS-3019-96) (يمكن استخدامه مع جهاز استخلاص الأحماض النووية الأوتوماتيكي ماكرو آند ميكرو-تيست (HWTS-3006C، HWTS-3006B)) من شركة جيانغسو ماكرو آند ميكرو-تيست ميد-تيك المحدودة. أضف 200 ميكرولتر من المحلول الملحي الطبيعي إلى راسب الثالوس. يجب اتباع تعليمات الاستخلاص في الخطوات التالية، وحجم الإيلوشن الموصى به هو100 ميكرولتر.
الخيار 2.
كاشف الاستخلاص المُوصى به: كاشف استخلاص أو تنقية الأحماض النووية (YDP302) من شركة تيانجين بيوتيك (بكين) المحدودة. يجب بدء الاستخلاص باتباع الخطوة الثانية من تعليمات الاستخدام بدقة (إضافة 200 ميكرولتر من محلول حمض الغلوتاميك المنظم إلى راسب الثالوس، ورجّه جيدًا حتى يتجمد الثالوس تمامًا). استخدم الماء الخالي من RNase/DNase للإيلوشنج، وحجم الإيلوشنج المُوصى به هو 100 ميكرولتر.
الخيار 3.
كاشف الاستخلاص المُوصى به: كاشف إطلاق العينة للاختبارات الكبرى والصغرى. يجب غسل عينة البلغم بإضافة 1 مل من المحلول الملحي الطبيعي إلى راسب الثالوس المُعالج المذكور أعلاه، ثم طردها مركزيًا بسرعة 13000 دورة/دقيقة لمدة 5 دقائق، ثم التخلص من السائل العلوي (مع الاحتفاظ بـ 10-20 ميكرولتر من السائل العلوي). للحصول على مسحة نقية من المستعمرات ومسحة المستقيم، يُضاف 50 ميكرولتر من كاشف إطلاق العينة مباشرةً إلى راسب الثالوس المُعالج المذكور أعلاه، ويجب استخلاص الخطوات التالية وفقًا لتعليمات الاستخدام.
